Inhibition of acyl-coenzyme A:cholesterol acyltransferase stimulates cholesterol efflux from macrophages and stimulates farnesoid X receptor in hepatocytes

We investigated the mechanism of spontaneous cholesterol efflux induced by acyl-coenzyme A:cholesterol acyltransferase (ACAT) inhibition, and how an alteration of cholesterol metabolism in macrophages impacts on that in HepG2 cells. Oleic acid anilide (OAA), a known ACAT inhibitor reduced lipid storage substantially by promotion of cholesterol catabolism and repression of cholesteryl ester accumulation without further increase of cytotoxicity in acetylated low-density lipoprotein-loaded THP-1 macrophages. Analysis of expressed mRNA and protein revealed that cholesterol 7alpha-hydroxylase (CYP7A1), oxysterol 7alpha- hydroxylase (CYP7B1), and cholesterol 27-hydroxylase (CYP27) were highly induced by ACAT inhibition. The presence of a functional cytochrome P450 pathway was confirmed by quantification of the biliary cholesterol mass in cell monolayers and extracelluar medium. Notably, massively secreted biliary cholesterol from macrophages suppressed the expression of CYP7 proteins in a farnesoid X receptor (FXR)-dependent manner in HepG2 cells. The findings reported here provide new insight into mechanisms of spontaneous cholesterol efflux, and suggest that ACAT inhibition may stimulate cholesterol-catabolic (cytochrome P450) pathway in lesion-macrophages, in contrast, suppress it in hepatocyte via FXR induced by biliary cholesterol (BC).

Oleoyl-estrone metabolic effects in relation with caloric restriction in inbred beta rats with spontaneous obesity and type 2 diabetes

Rats endocriadas de la línea IIMBeta con obesidad, hipertriacilglicerolemia y diabetes espontáneas fueron tratadas con oleoil-estrona durante 10 días. Un grupo con restricción alimentaria fue incluido en el estudio a fin de aislar algunos efectos de la oleoil-estrona dependientes de la restricción calórica que ésta promueve. Veinticinco ratas Beta macho de 200 dias de edad a los que se suministró 0.2 ml de aceite de girasol por día se dividieron en los seguientes grupos: (1) dosis diaria de 10 nmol/g de oleoil-estrona ; (2) restringido; (3) control. Las variables medidas fueron: proteínas corporales totales, agua y lípidios; pesos de los panículos adiposos retroperitoneal y epididimario; urea, glucosa, insulina, colesterol y triacilgliceroles plasmáticos. Los valores de biomasa y de ingesta de alimentos se registraron diariamente. Los grupos tratados con oleoil-estrona y restringido mostraron variaciones similares en composicíon corporal y disminuciones significativas en peso corporal debidas a reducciones en la ingesta de alimentos. Los tratamientos con oleoil-estrona y restringido disminuyeron significamente los pesos de los panículos adiposos retroperitoneales, pero no de los epididimarios. En los grupos tratados con oleoil-estrona y restringido la hiperglicemia disminuyó y la insulinemia lo hizo en forma significativa. Los valores de colesterol total plasmático normal y la hipertriacilglicerolemia característicos de las ratas Beta disminuyeron fuertemente comparados con los controles, aunque alcanzaron valores significa-tivamente diferentes entre los grupos tratados con oleoil-estrona y restringido. El colesterol total plasmático aparece como más sensible a la restricción calórica que los traicilgliceroles a través de un efecto específico mediado por la oleoil-estrona.

Effect of lipoxygenase and cyclo-oxygenase inhibition on oleic acid-induced lung oedema

Luego de una infusión de ácido oleico (AO) durante 10 minutos, se estudió la contribución de los metabolitos secundarios de la cicloxigénasa y de la lipoxigenasa en la hemodinamia y en la formación de edema en 21 pulmones aislados de conejo, mediante el registro de los cambios de la Tasa de Filtración de Líquido (TFL) y de la Presión de la Arteria Pulmonar (PAP). Cincuenta minutos antes de la infusión de AO se petrataron 7 pulmones con indometacina (inhibidor de cicloxigenasa), y 7 con diestilcarbamacina (inhibidor de lipoxigenasa). Siete no fueron retratados (grupo control). A los 12 minutos después de la infusión de AO (7.6ñ2.3 mg x min vs. 2.3ñ0.8 mg x min**-1 y 0.96ñ0.8 mg x min**-1 respectivamente) (p<0.01) se obtuvo que la TFL en el grupo de indometacina resultó mucho mayor que en el grupo control de indometacina resultó mucho mayor que en el grupo control y que en el grupo tratado con dietilcarbamacina (DEC). A los 20 minutos de la infusión, la TFL en los pulmones control resultó significativamente mayor que el valor correspondiente al grupo de DEC (4.2ñ0.5 mg x min vs. 1.6ñ1.0 mg x min**-1) (p<0.01). La Presión Media de la Arteria Pulmonar (PMAP) aumentó tanto en el grupo control como en el grupo de indometacina (de 16.0ñ2.0 Torr a 24.3ñ3.7 Torr luego de transcurrir 20 minutos de la infusión de AO y de 14.4ñ2.5 Torr a 24.6ñ3.6 Torr a los 10 minutos de la infusión de AO respectivamente); sin embargo, el valor de PMAP en el grupo de DEC no tuvo un cambio significativo al transcurrir 30 minutos luego de la infusión de AO (de 14.7ñ1.5 Torr a 16.0 ñ2.3 Torr) (p>0.05). Por lo tanto, concluimos que la inhibición selectiva de los metabolitos de la 5-lipoxigenasa (leucotrienos) pueden desempeñar un papel protector en el edema inducido por AO, mientras que la inhibición selectiva de la cicloxigenasa puede traer como consecuencia un efecto nocivo en la permeabilidad endotelial y en la hemodinamia en nuestra condición experimental

Phosphatidylcholine stimulates the activity of UDP-Gal beta 1-4 galactosyltransferase in normal human kidney proximal tumour cells.

Effects of various lipid components of low density lipoproteins (LDL) and serine on the regulation of UDP-Gal-beta 1-4-galactosyltransferase (GalT-2) activity have been investigated in normal proximal tubular (PT) cells. Addition of exogenous serine (0.1-0.75 mM), cholesterol (0-200 micrograms/ml medium), linoleic acid and oleic acid (0.1-0.75 mM) for 4 hr at 37 degrees C did not suppress the activity of GalT-2 in PT cells. Similarly, incubation of cells with glucosylceramide and lactosylceramide (25-50 micrograms/ml medium) did not alter GalT-2 activity in cells as compared to control. In contrast, palmitic acid (0-0.75 mM), phosphatidylethanolamine and sphingomyelin (0-200 micrograms/ml) stimulated GalT-2 activity by 20-36% as compared to control. Incubation of PT cells with D-alpha-dipalmitoyl phosphatidylcholine (0-200 micrograms/ml medium) also stimulated the activity of GalT-2, maximum stimulation (200%) occurring with 25 micrograms phosphatidylcholine/ml medium. However, at a higher concentration (200 micrograms/ml), the stimulation of the activity of GalT-2 was in the order of 27% compared to control. Dioleylphosphatidylcholine did not alter GalT-2 activity in PT cells. Thus, it is concluded that (i) various lipid components, sphingosine and serine present in LDL are not involved in the LDL-mediated suppression of GalT-2 activity in normal PT cells, and (ii) stringent structural requirements in the phosphatidylcholine molecule are necessary to exert a time and concentration dependent stimulation of GalT-2 activity.

Inverse ratio ventilation in adult respiratory distress syndrome: an experimental study in dogs regarding gasometric and hemodynamic aspects

Cardiorespiratory values were measured in 14 mongrel dogs with adult respiratory distress syndrome (ARDS), before and following the pressure controlled inverse ratio ventilation (IRV) at an inspiratory to expiratory ratio of 2:1. After the administration of oleic acid, the dogs developed metabolic acidosis, arterial hypoxemia, decreased compliance and cardiac index. There were no significant changes in any hemodynamic or arterial blood gases with the institution of inverse ratio ventilation. We concluded that the IRV with I:E of 2:1 and respiratory ratio of 12 bpm did not improve the arterial blood gases in ARDS. We speculate that to get better oxygenation in this model of mechanical ventilation we'll need increase the respiratory ratio to decrease the expiratory time and provoke the intrinsic positive end expiration pressure (PEEP).

Synthesis and contents of pancreatic exportable enzymes: effect of oleic acid intraduodenal administration

Ratas Sprague-Dawley fueron estimuladas intraduadernalmente con ácido oleico y sacrificadas 20, 40, 60 y 80 m luego de la instilación. En todos los grupos se administró, 10m antes del sacrifício, 50 uCi de 3H-fenilalanina (3H-F) intraperitoneal. Se cuantificaron los niveles intrapancreáticos de Am, Chtg, Tg y Li y la incorporación de 3H-F en las proteínas secretoras. A los 40 m de la administración de ácido oleico se registró la máxima estimulación de ácido oleico se registró la máxima estimulación para Chtg (45%), Tg (38%) y Li (23%) por sobre los valores controles, no modificándose la Am. Todos los valores enzimáticos cayeron por debajo de los controles a los 60 y 80 minutos. La incorporación 3H-F fue máxima a los 40 m decayendo a tiempos más prolongados. En el presente trabajo demostramos que la administración intraduodenal de ácido oleico genera un aumento no paralelo en el nivel intrapancreático de algunas enzimas exportables, y que dichos valores caen a partir de los 40 m post-instilación, siendo la síntesis proteica afectada de manera similar

Efeitos hemodinâmicos da ventilaçäo com alta frequência e ventilaçäo controlada mecânica em cäes submetidos à injeçäo venosa de ácido oleico / Hemodynamic effects of high frequency ventilation and conventional mechanical ventilation in dogs subjected to entravenous injection of oleic acid

Para avaliar-se os efeitos hemodinâmicos da ventilaçäo de alta freqüência em jatos (VAFJ) em relaçäo à ventilaçäo mecânica convencional (VCM), na vigência de insuficiência respiratória aguda, foi estabelecido um modelo experimental de lesäo pulmonar provocada em cäes pela injeçäo venosa de ácido oleico (0,07 ml.kg**-1). Foram estudados 16 cäes (15, 91 + ou - 3,27 kg) divididos em 2 grupos. Grupo I (8 cäes) foram ventilados pelo método convencional (VCM). Grupo II (8 cäes) foram ventilados pela técnica de alta freqüencia em jatos (VAFJ), a uma freqüência ventilatória de 200 vezes por minuto. A avaliaçäo hemodinâmica foi feita através de determinaçäo do débito cardíaco e das pressöes ao nível de átrio direito, ventrículo direito, artéria pulmonar e capilar pulmonar, raiz da aorta e ventrículo esquerdo. Estes cateteres foram conectados a transdutores de pressäo e polígrafo "Hewlett Packard". Foram determinadas as pressöes na traquéia e na pleura, colocando-se um "intracath" próximo à carina e no espaço pleural respectivamente. O estudo foi conduzido em 2 etapas. controle (A) e após injeçäo de ácido oleico (B). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (análise de variância para medidas repetidas), mostrando näo haver diferenças hemodinâmicas significativas entre (A) e (B) comparando-se VAFJ com VCM. Os autores concluem que, embora no modelo experimental utilizado näo ter havido diferenças significativas quanto a repercussöes hemodinâmicas, mais estudos säo necessários para a extrapolaçäo dos mesmos resultados para seres humanos